Optimización de tecnologías BacMam para aplicaciones en biología celular y terapia génica

Abstract

Desde los comienzos de la humanidad, ésta ha utilizado a las distintas entidades biológicas de su entorno como materia prima para el desarrollo de herramientas diversas que le permitieran subsistir y mejorar su calidad de vida, con más o menos conocimiento del funcionamiento de dichos organismos y de sus productos derivados. En 1796 el médico británico Edward Jenner desarrolló la primera vacuna contra una enfermedad de origen viral: la viruela. Sin embargo, para ese entonces el pequeño tamaño de los virus les impedía a los científicos y científicas dilucidar cuáles eran los patógenos causantes de ciertas enfermedades como la viruela. Se tardaría un siglo más, con el invento del microscopio electrónico, en descubrir y comenzar a describir a las entidades que denominamos virus. Desde esos tiempos y, en particular, con el nacimiento de la ingeniería genética en la década de 1970, las tecnologías en las ciencias de la vida han crecido de manera exponencial. La posibilidad de intervenir clonando y modificando el material genético de organismos y sus movilomas asociados ha hecho posible una expansión del conocimiento general sobre la materia viva pero, además, también ha facilitado la aparición de numerosos bienes y servicios que han mejorado la calidad de vida humana. En este contexto el viroma del planeta es un espacio sumamente importante, cuya abundancia y variedad han mostrado (y siguen haciéndolo) ser una fuente inagotable para el desarrollo de aplicaciones biotecnológicas. La producción de proteínas recombinantes, la generación de vectores virales adaptados para la entrega de secuencias específicas a células y tejidos diana, o el desarrollo de vacunas, entre otras posibles aplicaciones, son claros ejemplos de esos alcances. En este sentido, los baculovirus se destacan como un grupo prominente de entidades virales con un papel importante en la biotecnología. La capacidad de los baculovirus de transducir (no infectar) células de mamíferos con un alto grado de bioseguridad permite su utilización como vectores empleados en terapias génicas, cuyas prestaciones deben ser ampliadas y mejoradas. En este trabajo, se explora el uso de un baculovirus de Autographa californica (Autographa californica multiple nucleopolyhedrovirus o AcMNPV) para vehiculizar genes terapéuticos en mamíferos en distintos modelos de enfermedad, y sus posibles mejoras a partir de la pseudotipificación con la glicoproteína del Virus de la Estomatitis Vesicular, para así aumentar su capacidad de traducción de células de mamífero. También se aborda la posibilidad de incorporar un circuito de liberación de minicírculos mediante el uso de la tecnología Cre/LoxP, y de liberación de ministrings mediante el uso de la tecnología TelRL/iTelomerasa, ambos conteniendo un origen de replicación del virus de Epstein-Barr, para así aumentar su tiempo de permanencia y de expresión de genes de interés dentro de la célula blanco.